ripa裂解液(RIPA Lysis Buffer)是一種傳統的細胞組織快速裂解液。索萊寶提供ripa裂解液現貨出售。另外提供ripa裂解液配方及說明書下載。索萊寶生化試劑商城。 普通RIPA裂解液(組織/細胞)
產品分類
運輸溫度:常溫運輸
普通RIPA裂解液(組織/細胞)產品配有一支PMSF(100mM,1.5ml)
產品簡介:RIPA 組織/細胞裂解液是利用表面活性劑等來裂解細胞膜(包括核膜)。本試劑提取的蛋白為可溶性總蛋白。
使用說明 :
如發現RIPA有沉淀,請放室溫半小時或者常溫水浴使沉淀溶解。
根據使用量,取每1ml RIPA 加入10ul PMSF,使PMSF的最終濃度為1mM,混勻備用 (PMSF現用現加)。
1、樣品前處理:
a)對于貼壁細胞:去除培養液,用 PBS、生理鹽水或無血清培養液洗一遍。按照 6 孔板每孔細胞量加入150-250 ul裂解液的比例加入裂解液。用槍吹打數下,使裂解液和細胞充分接觸。
b)對于懸浮細胞:離心收集細胞,按照6孔板每孔細胞量加入150-250ul裂解液的比例加入裂解液,用手指輕彈懸浮細胞以充分裂解。充分裂解后應沒有明顯的細胞沉淀。如果細胞量較多,必需分裝成 5-10×105細胞/管,然后再裂解。
c)對于組織樣品:把組織剪切成細小的碎片。按照每20mg組織加入150-250ul裂解液的比例加入裂解液
(如果裂解不充分可以適當添加更多的裂解液,如果需要高濃度的蛋白樣品,可以適當減少裂解液的用量) 。
用玻璃勻漿器勻漿,直至充分裂解。
2、后處理:
將裂解后的樣品10000-14000g離心3-5分鐘,取上清,即可進行后續的PAGE、Western和免疫沉淀等操作。
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注意:以上文獻 僅供參考
普通RIPA裂解液(組織/細胞)
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