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當(dāng)前位置:首頁產(chǎn)品中心細(xì)胞生物學(xué)中性粒細(xì)胞分離系列P9204小鼠外周血中性粒細(xì)胞分離(Plus)試劑盒
小鼠外周血中性粒細(xì)胞分離(Plus)試劑盒

產(chǎn)品簡介

是一種用于從小鼠外周血中分離中性粒細(xì)胞的試劑盒,其主要組成包括試劑A、試劑B、鼠紅細(xì)胞沉降液、紅細(xì)胞裂解液和細(xì)胞洗滌液等。 小鼠外周血中性粒細(xì)胞分離(Plus)試劑盒

產(chǎn)品型號:P9204
更新時間:2025-08-09
廠商性質(zhì):生產(chǎn)廠家
訪問量:1246
詳細(xì)介紹在線留言

產(chǎn)品簡介:

  同常規(guī)試劑盒相比,本試劑盒通過優(yōu)化分離液相關(guān)成分,進(jìn)一步提高了小鼠外周血中性粒細(xì)胞的分離純度,更適用于流式細(xì)胞儀分選等下游實驗操作。

產(chǎn)品組成

試劑盒組分

規(guī)格

保存條件

試劑A

200mL

2~8℃

試劑B

100mL

2~8℃

鼠紅細(xì)胞沉降液

100mL

室溫

紅細(xì)胞裂解

100mL

室溫

細(xì)胞洗滌液

200mL

室溫

操作步驟(僅供參考)

1、 沉降去除紅細(xì)胞取新鮮抗凝血與血液稀釋液(注射用生理鹽水或1XPBS)及紅細(xì)胞沉降液按照1:1:1比例混勻,室溫下靜置30-40min后,可見紅細(xì)胞沉于試管底部,小心(富含細(xì)胞及血小板)用于后續(xù)細(xì)胞分離 

2、 樣本分離15mL離心管中先加入4mLA后將2mLB沿管壁緩慢疊加45°傾斜試管試劑A之上,形成梯度界面沉降后上清小心平鋪于分面上方。注意分離液與樣本總體積不能超過離心管的三分之二,否則會影響分離效果。)

3、 室溫條件下水平轉(zhuǎn)子600-1000g25-30minutes(血液體積越大所需心力越大,離心時間越長,最佳分離條件需摸索,離心最大轉(zhuǎn)速不超過1000g)

4、 離心后,上層白膜層為單個核細(xì)胞層下層白膜層為粒細(xì)胞層。

5、小心吸取粒細(xì)胞層至新的離心管中,加入10mL細(xì)胞洗滌液洗滌細(xì)胞。250g,離心10min(如有紅細(xì)胞污染可依據(jù)樣本體積加入適量紅細(xì)胞裂解液祛除污染)。

6、 棄上清加入5mL細(xì)胞清洗液重懸細(xì)胞250g離心10min

7、 棄上清重懸細(xì)胞備用。

注意事項:

A.開封前顛倒混勻,本分離液為無菌產(chǎn)品,為延長分離液保存時間,請在無菌條件下啟封,避免微生物污染。

B.請根據(jù)實驗需要預(yù)先無菌分裝分離液試劑,并在其恢復(fù)至室溫(18℃~25℃后使用,如室內(nèi)溫度較低,可將分離液預(yù)熱。4℃或者是溫度較低的條件下離心,可能會導(dǎo)致白膜層不清晰。

C.血液樣本最好為新鮮抗凝血(采血2h以內(nèi)),為保持中性粒細(xì)胞的活性,應(yīng)避免冷凍和冷藏。

D.稀釋血液或洗滌細(xì)胞,不可使用含CaMg離子的緩沖液及培養(yǎng)液,其成分會導(dǎo)致血細(xì)胞凝集,大大降低細(xì)胞得率及純度。

E.部分塑料制品(如聚苯乙烯)因其帶有的靜電作用,可能會導(dǎo)致細(xì)胞掛壁,影響分離效果。

F.血液樣本的粘稠度或者是溫度差異,可能會影響分離效果,可以調(diào)節(jié)離心轉(zhuǎn)數(shù)和離心時間,摸索最佳的分離條件。

G.如果要進(jìn)一步對分離的細(xì)胞進(jìn)行培養(yǎng),注意全程保持無菌操作,避免微生物污染。


小鼠外周血中性粒細(xì)胞分離(Plus)試劑盒

小鼠外周血中性粒細(xì)胞分離(Plus)試劑盒

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