LB培養基分類及倒板是什么 LB培養基是一種培養基的名稱,生化分子實驗中一般用該培養基來預培養菌種,使菌種成倍擴增,達到使用要求.
液態培養基
根據《分子克隆實驗指南》（J.薩姆布魯克D.W.拉塞爾著）配制每升培養基,應該在950 ml去離子水中加入:
胰蛋白胨10g
酵母提取物5g
NaCl 10g
搖動容器直溶質溶解.用5mol/LNaOH調pH7.0.用去離子水定容1L.在15psi高壓下蒸汽滅菌21min.
培養的菌種一般是經過改造的無法在外界環境單獨存活和擴增的工程菌.通過培養工程菌,我們可以表達大量的外源蛋白,也可以拿到帶有外源基因的質粒,工程菌的有效擴增是生化分子實驗的基礎.
胰蛋白胨(Tryptone) 10g/L
酵母提取物(Yeast extract) 5g/L
氯化鈉(NaCl) 10g/L
另外根據經驗值用NaOH調節該培養基的pH,使其達到7.4(該pH適合目前使用廣的原核表達菌種E.coli的生長)
固態培養基
LB培養基1L和液體一樣，加10g~15g瓊脂粉，一定要在溫度降下之前加好抗
生素，并且倒好板。
倒板
1.配制：100mlLB培養基加入1~1.5g瓊脂粉
2.抗生素的加入：高壓滅菌后，將融化的LB固體培養基置于55℃的水浴中，待培養基溫度降到55℃時（手可觸摸）加入抗生素，以免溫度過高導致抗生素失效，并充分搖勻。
3.倒板：一般15ml-20ml倒1個板子。培養基倒入培養皿后，打開蓋子，在紫外下照10-15分鐘。
4.保存：用封口膠封邊，并倒置放于4℃保存，一個月內使用。
ph值需要控制在7.4
更新時間：2015-08-11
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