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ELISA試劑盒操作中，咱們都認為ELISA試驗的原理好像很簡單，不外乎固定抗原，添加一抗、二抗和底物，間中夾雜著洗刷和關閉。然而，即使是平淡無奇的洗刷和關閉，假如做得不太好，也有或許毀了整個試驗。在試驗結束時，咱們是否能獲得有意義的信息，這在很大程度上取決于成果的信噪比。布景噪音會影響您對成果的判斷。今天小編怎么教你降低ELISA試劑盒操作的布景噪音。
一、洗刷很重要：洗刷步驟看似很無聊，其實很重要，因為假如未結合的資料(如非特異結合的抗體或檢測試劑)殘留在微孔板中，那么它會添加布景噪音。如有必要，可添加洗刷液中的鹽濃度，這會阻撓非特異結合反應。假如布景過高，而您置疑洗刷不夠時，可以測驗添加洗刷次數。
二、關閉更關鍵：關閉液的作用是讓不相關的蛋白占有微孔板中潛在的結合位點。這就降低了可產生信號的抗體非特異結合的機會。您當然也期望抗體只與目的蛋白結合吧。假如您的布景過高，置疑關閉不充分，那么您可以測驗運用更高濃度的關閉液，或適當延伸關閉時間。
三、抗體濃度須優化：咱們通常會follow師兄師姐留下來的操作步驟，但是假如試劑稍有不同，則或許需要優化抗體的量。記住，非特異的抗體結合會添加布景。為了避免這一點，切勿運用過多的一抗或二抗。
四、檢測試劑要適量：另一點也很清楚明了：切勿運用過多的檢測試劑。假如濃度過高，或者未正確稀釋，則會導致高布景。也不要顯色過度，如有必要，優化一下何時應加入終止液。
假如您的ELISA試劑盒操作中不幸地遇到了高布景，那么也無需太憂慮，順次檢查ELISA體系中的組分，并排除或許存在的問題。盡心優化，相信很快就會有美麗的成果。
更新時間：2021-04-25
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