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細胞自噬染色檢測試劑盒的使用方法
2018-06-29 細胞自噬染色檢測試劑盒(MDC法)使用說明產品說明：自噬(autophagy)是細胞受到刺激后吞噬自身的細胞質或細胞器，終將吞食物在溶酶體內降解的過程，自噬體(autophagosome)為雙層膜包被的圓形或橢圓形結構，內含細胞質、長壽蛋白質和異常蛋白聚集物，損傷或多余細胞器如線粒體、粗面內質網和微體、病毒和細菌等。單丹磺酰尸胺(Dansylcadaverine,MDC)是一種熒光色素，是嗜酸性染色劑，通常被用于檢測自噬體形成的特異性標記染色劑，其檢測激發濾光片波長355nm...
ECL Plus超敏發光液使用方法
2018-06-29 ECLPlus超敏發光液使用方法：1、常規電泳、轉膜、HRP標記抗體或核酸探針孵育、洗膜。注意用HRP標記IgG或用一抗-鏈親和素-生物素-HRP夾心法。核酸雜交膜用HRP標記探針雜交，洗膜。2、在洗滌膜上的HRP標記二抗的同時，新鮮配制發光工作液：分別取等體積的溶液A和B混合，放置使之恢復室溫否則會減弱熒光強度。建議立即使用工作液，室溫放置數小時后仍可使用但靈敏度略有減低。3、用鑷子取出膜，搭在濾紙上瀝干洗液但勿使膜*干燥。將膜*浸入并與發光工作液充分接觸（約0.125ml...
線粒體膜電位檢測試劑盒的作用說明
2018-06-19 產品作用1、線粒體膜電位檢測試劑盒是一種以JC-1為熒光探針，快速靈敏地檢測細胞、組織或純化的線粒體膜電位變化的試劑盒，線粒體膜電位的下降是細胞凋亡早期的一個標志性事件。2、通過JC-1從紅色熒光到綠色熒光的轉變可以很容易地檢測到細胞膜電位的下降，同時也可以用JC-1從紅色熒光到綠色熒光的轉變作為細胞凋亡早期的一個檢測指標。3、JC-1是一種檢測線粒體膜電位的理想熒光探針。在線粒體膜電位較高時，JC-1聚集在線粒體的基質(matrix)中，形成聚合物，產生紅色熒光；4、在線粒...
神奇濾布的作用說明
2018-06-04 基因工程轉化真菌和一些土壤細菌時，往往需要先消化掉厚厚的細胞壁，制備分離原生質體以便進行轉化，即使是大家很熟悉的酵母轉化，當簡便的醋酸鋰方法不起作用時，原始也是有效方法還是原生質體轉化。當經過消化處理的菌體混合液經過Miracloth過濾后，就可以去掉未被消化*的菌體和雜質，分離得到的“裸露的”原生質體就可以準備進行轉化或者電轉了。如果沒有這一步的分離，未*消化的菌體由于生長迅速，會嚴重干擾結果。植物基因組純化相對比較麻煩一點，市面上有不少試劑盒可供選擇，多數純化基因組DNA...
活性氧檢測試劑盒試劑準備說明
2018-05-17 活性氧檢測試劑盒試劑準備說明試劑準備：1.DCFH-DA可稀釋于培養基或緩沖液中。血清或培養基顏色并不影響DCFH-DA及細胞內熒光產生，但可能會影響熒光顯微鏡觀察，干擾熒光分光光度計、熒光酶標儀或流式細胞儀熒光測定。可將DCFH-DA稀釋于無酚紅培養基或適宜的緩沖液如PBS中。這依賴于使用何種熒光設備進行測定。2.加入DCFH-DA的時機或孵育時間，以終能順利檢測細胞內活性氧為目的。藥物處理時間較短(6小時)或預計產生ROS效應較強，可后加DCFH-DA。3.活性氧供體含高...
胰蛋白酶消化液的配制及注意事項
2018-05-04 胰蛋白酶消化液的配制及注意事項胰蛋白酶消化液的配制（1）在D-Hanks液高壓滅菌之后，晾室溫，4℃保存備用。（2）稱取一定量胰蛋白酶粉末于研磨器中（夏天時研磨器應放在冰浴中），加入少量D-Hanks液碾磨100~1000次，調制成糊狀。再放入4℃預冷的適量D-Hanks液中，4℃下磁力攪拌使*溶解（一般4~12h）。（3）用NaHCO3干粉將胰酶溶液的pH調8.0左右（胰酶作用的適pH為8.2）。（4）過濾除菌（方法見前篇培養基的配制），—20℃保存。注意事項：1．由于組織...
如何選擇合適的透析袋
2018-04-27 正確選擇合適的截留分子量截留分子量的選擇是以預留在膜內的大分子的分子量和將要被除去的小分子污染物的分子量為基礎的。為達到合理有效的分離，需分離的兩種物質分子量的比率少為25.選擇截留分子量的經驗法則：選擇截留分子量值約為要保留的大分子分子量的一半，以獲得少90%的保留率。正確選擇扁平寬度透析袋扁平寬度的選擇取決于樣品體積和透析容量。較小的透析管透析更快；較大的透析管因擴散距離較長透析較慢。為易于使用，建議使用總長（包括閉合夾和頂部空間）為大約10-15厘米的透析袋透析袋的化學...
蛋白電泳 SDS-PAGE及Western blot
2018-04-13 蛋白電泳SDS-PAGE原理SDS是一種陰離子表面活性劑，能打斷蛋白質的氫鍵和疏水鍵，并按一定的比例和蛋白質分子結合成復合物，使蛋白質帶負電荷的量遠遠超過其本身原有的電荷，掩蓋了各種蛋白分子間天然的電荷差異。因此，各種蛋白質-SDS復合物在電泳時的遷移率，不再受原有電荷和分子形狀的影響，而只是棒長的函數。這種電泳方法稱為SDS-聚丙烯酰胺凝膠電泳（簡稱SDS—PAGE）。實驗使用過程中，還加入DTT或者巰基乙醇，以打開蛋白間的二硫鍵，破壞蛋白質的四級結構。SDS—PAGE常采...

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